L-osteoartrite (OA) hija waħda mill-mard tal-ġogi tal-għadam deġenerattiv kroniku fit-tul li taffettwa l-popolazzjoni ta’ età ta’ aktar minn 65 [
1]. Ġeneralment, pazjenti OA huma dijanjostikati bil-qarquċa bil-ħsara, sinovju infjammat, u kondroċiti mnaqqrin, li jikkawżaw uġigħ u dwejjaq fiżiku.
2]. Uġigħ artritiku huwa prinċipalment ikkawżat mid-deġenerazzjoni tal-qarquċa fil-ġogi permezz ta 'infjammazzjoni, u meta l-qarquċa tkun bil-ħsara serjament l-għadam jista' jaħbat ma 'xulxin u jikkawża uġigħ insupportabbli u tbatija fiżika.
3]. L-involviment ta 'medjaturi infjammatorji b'sintomi bħal uġigħ, nefħa u ebusija tal-ġog huwa dokumentat tajjeb. F'pazjenti OA, ċitokini infjammatorji, li jikkawżaw l-erożjoni tal-qarquċa u l-għadam subkondrali jinstabu fil-fluwidu sinovjali.
4]. Żewġ ilmenti ewlenin li l-pazjenti bl-OA ġeneralment ikollhom huma uġigħ u infjammazzjoni sinovjali. Għalhekk l-għanijiet primarji tat-terapiji OA attwali huma li jbaxxu l-uġigħ u l-infjammazzjoni. [
5]. Għalkemm it-trattamenti OA disponibbli, inklużi mediċini mhux sterojdi u sterojdi, wrew effikaċja fit-tnaqqis tal-uġigħ u l-infjammazzjoni, l-użi fit-tul ta 'dawn il-mediċini għandhom konsegwenzi severi fuq is-saħħa bħal disfunzjonijiet kardjovaskulari, gastro-intestinali u renali.
6]. Għalhekk, mediċina aktar effettiva b'inqas effetti sekondarji trid tiġi żviluppata għat-trattament tal-osteoartrite.
Prodotti tas-saħħa naturali qed isiru dejjem aktar popolari minħabba li huma sikuri u faċilment disponibbli [
7]. Mediċini tradizzjonali Koreani wrew effikaċja kontra bosta mard infjammatorju, inkluża l-artrite [
8]. Aucklandia lappa DC. hija magħrufa għall-proprjetajiet mediċinali tagħha, bħat-titjib taċ-ċirkolazzjoni tal-qi biex ittaffi l-uġigħ u serħan il-moħħ l-istonku, u ġiet użata tradizzjonalment bħala analġeżiku naturali.
9]. Rapporti preċedenti jissuġġerixxu li A. lappa jippossjedi anti-infjammatorji [
10,
11], analġeżiku [
12], kontra l-kanċer [
13], u gastroprotettivi [
14] effetti. L-attivitajiet bijoloġiċi varji ta 'A. lappa huma kkawżati mill-komposti attivi ewlenin tiegħu: costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone u costuslactone [
15]. Studji preċedenti jsostnu li costunolide wera proprjetajiet anti-infjammatorji fil-lipopolysaccharide (LPS), li kkaġunaw il-makrofaġi permezz tar-regolazzjoni ta 'NF-kB u mogħdija tal-proteina ta' xokk tas-sħana.
16,
17]. Madankollu, l-ebda studju ma investiga l-attivitajiet potenzjali ta' A. lappa għat-trattament tal-OA. Ir-riċerka preżenti investigat l-effetti terapewtiċi ta 'A. lappa kontra l-OA bl-użu ta' (monosodium-iodoacetate) MIA u mudelli ta 'annimali gerriema indotti mill-aċidu aċetiku.
Il-jodoaċetat tal-monosodju (MIA) huwa magħruf b'mod famuż biex jipproduċi ħafna mill-imgieba tal-uġigħ u l-karatteristiċi patofiżjoloġiċi tal-OA fl-annimali.
18,
19,
20]. Meta tiġi injettata fil-ġogi ta 'l-irkoppa, l-MIA tfixkel il-metaboliżmu tal-kondroċiti u tinduċi infjammazzjoni u sintomi infjammatorji, bħall-qarquċa u l-erożjoni tal-għadam subkondrali, is-sintomi kardinali ta' OA.
18]. Ir-rispons ta’ writhing indott bl-aċidu aċetiku huwa meqjus b’mod wiesa’ bħala s-simulazzjoni ta’ uġigħ periferali f’annimali fejn l-uġigħ infjammatorju jista’ jitkejjel kwantitattivament.
19]. Il-linja taċ-ċelluli makrofaġi tal-ġurdien, RAW264.7, tintuża popolarment biex tistudja r-reazzjonijiet ċellulari għall-infjammazzjoni. Malli jiġu attivati bl-LPS, il-makrofaġi RAW264 jattivaw mogħdijiet infjammatorji u joħorġu diversi intermedjarji infjammatorji, bħal dawn TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, u IL-6.
20]. Dan l-istudju evalwa l-effetti anti-noċiċettivi u anti-infjammatorji ta 'A. lappa kontra OA f'mudell ta' annimal MIA, mudell ta 'annimali indott mill-aċidu aċetiku, u ċelloli RAW264.7 attivati bl-LPS.
2. Materjali u Metodi
2.1. Materjal tal-Pjanti
L-għerq imnixxef ta 'A. lappa DC. użat fl-esperiment kien akkwistat minn Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Korea). Ġie identifikat mill-Prof. Donghun Lee, Dipartiment tal-Farmakoloġija Veġetali, Koll tal-Mediċina Koreana, Gachon University, u n-numru tal-kampjun tal-vawċer ġie depożitat bħala 18060301.
2.2. Analiżi HPLC ta 'A. lappa Estratt
A. lappa ġiet estratta bl-użu ta 'apparat ta' rifluss (ilma distillat, 3 sigħat f'100 °C). Is-soluzzjoni estratta ġiet iffiltrata u kkondensata bl-użu ta 'evaporatur ta' pressjoni baxxa. L-estratt ta 'A. lappa kellu rendiment ta' 44.69% wara t-tnixxif bil-friża taħt -80 °C. Analiżi kromatografika ta 'A. lappa saret b'HPLC konness bl-użu ta' sistema HPLC 1260 InfinityⅡ (Agilent, Pal Alto, CA, USA). Għas-separazzjoni kromatika, il-kolonna EclipseXDB C18 (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) intużat f'35 °C. Total ta '100 mg tal-kampjun ġie dilwit f'10 mL ta' 50% metanol u ivvibrat għal 10 min. Il-kampjuni ġew iffiltrati b'filtru tas-siringa (Waters Corp., Milford, MA, USA) ta '0.45 μm. Il-kompożizzjoni tal-fażi mobbli kienet 0.1% aċidu fosforiku (A) u aċetonitrile (B) u l-kolonna ġiet eluduta kif ġej: 0-60 min, 0%; 60-65 min, 100%; 65-67 min, 100%; 67-72 min, 0% solvent B b'rata ta 'fluss ta' 1.0 mL/min. L-effluwent ġie osservat f'210 nm bl-użu ta 'volum ta' injezzjoni ta '10 μL. L-analiżi saret fi tliet kopji.
2.3. Akkomodazzjoni u Ġestjoni tal-Annimali
Firien maskili Sprague–Dawley (SD) ta’ 5 ġimgħat u ġrieden maskili ICR ta’ 6 ġimgħat inxtraw minn Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea). L-annimali nżammu f'kamra bl-użu ta' temperatura kostanti (22 ± 2 °C) u umdità (55 ± 10%) u ċiklu ta 'dawl/dlam ta' 12/12-il siegħa. L-annimali kienu familjari mal-kundizzjoni għal aktar minn ġimgħa qabel ma beda l-esperiment. L-annimali kellhom provvista ad libitum ta’ għalf u ilma. Ir-regoli etiċi attwali għall-kura u l-immaniġġjar tal-annimali fl-Università Gachon (GIACUC-R2019003) ġew segwiti b'mod strett fil-proċeduri sperimentali kollha tal-annimali. L-istudju kien iddisinjat investigatur blinded u prova parallela. Segwejna l-metodu tal-ewtanasja skont il-linji gwida tal-Kumitat tal-Etika Sperimentali tal-Annimali.
2.4. MIA Injezzjoni u Trattament
Il-firien ġew separati b'mod każwali f'4 gruppi, jiġifieri sham, kontroll, indomethacin, u A. lappa. Billi kienu anestetizzati b'taħlita ta '2% isofluorane O2, il-firien ġew injettati bl-użu ta' 50 μL ta 'MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) intra-artikulari fil-ġogi tal-irkoppa biex iwasslu għal OA sperimentali. It-trattamenti saru kif hawn taħt: il-gruppi ta 'kontroll u sham inżammu biss b'dieta bażika AIN-93G. Biss, il-grupp indomethacin kien ipprovdut b'indomethacin (3 mg / kg) inkorporat fid-dieta AIN-93G u A. lappa 300 mg / kg grupp ġie assenjat għal dieta AIN-93G supplimentata b'A. lappa (300 mg / kg). It-trattamenti tkomplew għal 24 jum mill-jum tal-induzzjoni tal-OA bir-rata ta '15-17 g għal kull 190-210 g piż tal-ġisem fuq bażi ta' kuljum.
2.5. Kejl li jġorr il-piż
Wara l-induzzjoni OA, il-kejl tal-kapaċità li jġorr il-piż tar-riġlejn ta 'wara tal-firien sar bl-incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) kif skedat. Id-distribuzzjoni tal-piż fuq ir-riġlejn ta’ wara ġiet ikkalkulata: il-kapaċità tal-ġarr tal-piż (%)
