Żejt pur Saposhnikovia divaricata għax-xemgħa u s-sapun li jagħmlu żejt essenzjali tad-diffużur bl-ingrossa ġdid għal diffużuri tal-berner tal-qasab

deskrizzjoni qasira:

2.1. Preparazzjoni ta 'SDE

Ir-riżomi ta 'SD inxtraw bħala ħaxix imnixxef minn Hanherb Co. (Guri, Korea). Il-materjali tal-pjanti ġew ikkonfermati tassonomikament minn Dr Go-Ya Choi tal-Istitut tal-Korea tal-Mediċina Orjentali (KIOM). Ġie depożitat kampjun ta’ vawċer (numru 2014 SDE-6) fl-Erbarju Korean tar-Riżorsi Standard tal-Ħxejjex. Ir-riżomi mnixxfa ta 'SD (320 g) ġew estratti darbtejn b'etanol ta' 70% (b'rifluss ta '2 sigħat) u l-estratt imbagħad ġie kkonċentrat taħt pressjoni mnaqqsa. Id-decoction ġiet iffiltrata, lajofilizzata, u maħżuna f'4°C. Ir-rendiment ta 'estratt imnixxef minn materjali tal-bidu mhux raffinati kien 48.13% (w/w).

2.2. Analiżi Kwantitattiva tal-Kromatografija Likwida ta' Prestazzjoni Għolja (HPLC).

Analiżi kromatografika saret b'sistema HPLC (Waters Co., Milford, MA, USA) u detector ta 'array photodiode. Għall-analiżi HPLC ta' SDE, il-prim-O-L-istandard tal-glucosylcimifugin inxtara mill-Istitut tal-Promozzjoni tal-Korea għall-Industrija tal-Mediċina Tradizzjonali (Gyeongsan, Korea), usek-O-glucosylhamaudol u 4′-O-β-D-glukosil-5-O-methylvisamminol ġew iżolati fil-laboratorju tagħna u identifikati minn analiżi spettrali, primarjament minn NMR u MS.

Kampjuni SDE (0.1 mg) ġew maħlula f'70% etanol (10 mL). Is-separazzjoni kromatografika saret b'kolonna XSelect HSS T3 C18 (4.6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, USA). Il-fażi mobbli kienet tikkonsisti f'acetonitrile (A) u 0.1% aċidu aċetiku fl-ilma (B) b'rata ta 'fluss ta' 1.0 mL/min. Intuża programm gradjent f'diversi stadji kif ġej: 5% A (0 min), 5–20% A (0–10 min), 20% A (10–23 min), u 20–65% A (23–40 min). ). Il-wavelength ta 'detezzjoni ġie skannjat f'210-400 nm u rreġistrat f'254 nm. Il-volum tal-injezzjoni kien 10.0μL. Soluzzjonijiet standard għad-determinazzjoni ta’ tliet kromoni ġew ippreparati f’konċentrazzjoni finali ta’ 7.781 mg/mL (prim-O-glucosylcimifugin), 31.125 mg/mL (4′-O-β-D-glukosil-5-O-methylvisamminol), u 31.125 mg/mL (sek-O-glucosylhamaudol) fil-metanol u miżmum f'4°C.

2.3. Evalwazzjoni ta 'Attività Kontra l-InfjammazzjoniIn Vitro

2.3.1. Kultura taċ-Ċelloli u Trattament tal-Kampjun

Ċelloli RAW 264.7 inkisbu mill-Ġbir tal-Kultura tat-Tip Amerikan (ATCC, Manassas, VA, USA) u mkabbra f'medja DMEM li fiha 1% antibijotiċi u 5.5% FBS. Iċ-ċelloli ġew inkubati f'atmosfera umidifikata ta '5% CO2 f'37 ° C. Biex tistimula ċ-ċelloli, il-medju ġie sostitwit b'medja DMEM friska, u lipopolysaccharide (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) f'1μg/mL ġie miżjud fil-preżenza jew in-nuqqas ta 'SDE (200 jew 400μg/mL) għal 24 siegħa addizzjonali.

2.3.2. Determinazzjoni ta' Nitric Oxide (NO), Prostaglandin E2 (PGE2), Fattur ta' Necrosis Tumur-α(TNF-α), u Interleukin-6 (IL-6) Produzzjoni

Iċ-ċelloli ġew ittrattati b'SDE u stimulati b'LPS għal 24 siegħa. L-EBDA produzzjoni ġiet analizzata billi tkejjel in-nitrit bl-użu tar-reaġent Griess skont studju preċedenti [12]. Sekrezzjoni taċ-ċitokini infjammatorji PGE2, TNF-α, u IL-6 ġie determinat bl-użu ta 'kit ELISA (sistemi ta' R&D) skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur. L-effetti tal-SDE fuq il-produzzjoni tal-NO u taċ-ċitokini ġew determinati f'540 nm jew 450 nm bl-użu ta' Wallac EnVision™qarrej tal-mikroplate (PerkinElmer).

2.4. Evalwazzjoni ta 'Attività ta' AntiosteoartriteIn Vivo

2.4.1. Annimali

Firien maskili Sprague-Dawley (7 ġimgħat) inxtraw mingħand Samtako Inc. (Osan, Korea) u miżmuma taħt kundizzjonijiet ikkontrollati b'ċiklu ta' dawl/dlam ta' 12-il siegħa f'°C u% umdità. Il-firien ġew ipprovduti b'dieta tal-laboratorju u ilmaad libitum. Il-proċeduri sperimentali kollha twettqu f'konformità mal-linji gwida tal-Istituti Nazzjonali tas-Saħħa (NIH) u approvati mill-Kumitat għall-Kura u l-Użu tal-Annimali tal-università ta 'Daejeon (Daejeon, ir-repubblika tal-Korea).

2.4.2. Induzzjoni ta' OA b'MIA fil-Firien

L-annimali ġew randomised u assenjati għal gruppi ta 'trattament qabel il-bidu tal-istudju (għal kull grupp). Soluzzjoni MIA (3 mg/50μL ta '0.9% salina) ġiet injettata direttament fl-ispazju intra-artikulari ta' l-irkoppa tal-lemin taħt anestesija indotta b'taħlita ta 'ketamine u xylazine. Il-firien tqassmu b’mod każwali f’erba’ gruppi: (1) il-grupp tal-melħ mingħajr injezzjoni MIA, (2) il-grupp MIA b’injezzjoni MIA, (3) il-grupp ikkurat b’SDE (200 mg/kg) b’injezzjoni MIA, u (4) ) il-grupp ittrattat indomethacin- (IM-) (2 mg/kg) b'injezzjoni MIA. Il-firien ingħataw mill-ħalq b'SDE u IM ġimgħa qabel l-injezzjoni MIA għal 4 ġimgħat. Id-dożaġġ ta 'SDE u IM użat f'dan l-istudju kien ibbażat fuq dawk impjegati fi studji preċedenti [10,13,14].

2.4.3. Kejl tad-Distribuzzjoni tal-Piż ta' Hindpaw

Wara l-induzzjoni OA, il-bilanċ oriġinali fil-kapaċità li jġorru l-piż ta 'hindpaws kien imfixkel. Intuża tester tal-inkapaċità (strumentazzjoni Linton, Norfolk, UK) biex jevalwa l-bidliet fit-tolleranza tal-piż. Il-firien tpoġġew bir-reqqa fil-kamra tal-kejl. Il-forza li ġġorr il-piż eżerċitata mir-riġlejn ta' wara kienet medja fuq perjodu ta' 3 s. Il-proporzjon tad-distribuzzjoni tal-piż kien ikkalkulat bl-ekwazzjoni li ġejja: [piż fuq id-dirgħajn ta’ wara tal-lemin/(piż fuq id-dirgħajn ta’ wara tal-lemin + piż fuq ir-riġlejn ta’ wara tax-xellug)] × 100 [15].

2.4.4. Kejl tal-Livelli tas-Serum Cytokine

Il-kampjuni tad-demm ġew ċentrifugati f'1,500 g għal 10 min f'4 ° C; imbagħad is-serum inġabar u nħażen f'-70 ° C sakemm jintuża. Il-livelli ta 'IL-1β, IL-6, TNF-α, u PGE2 fis-serum ġew imkejla bl-użu ta 'kits ELISA minn R&D Systems (Minneapolis, MN, USA) skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur.

2.4.5. Analiżi Kwantitattiva RT-PCR f'ħin reali

L-RNA totali ġie estratt mit-tessut tal-ġogi tal-irkoppa bl-użu tar-reaġent TRI® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), traskritt b'lura f'cDNA u amplifikat b'PCR bl-użu ta' kit TM One Step RT PCR b'SYBR aħdar (Applied Biosystems) , Grand Island, NY, USA). PCR kwantitattiv f'ħin reali twettqet bl-użu tas-sistema Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Is-sekwenzi tal-primer u s-sekwenza tas-sonda huma murija fit-Tabella1. Alikwoti ta 'cDNAs tal-kampjun u ammont ugwali ta' cDNA GAPDH ġew amplifikati bit-taħlita prinċipali TaqMan® Universal PCR li fiha DNA polymerase skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). Il-kundizzjonijiet tal-PCR kienu 2 min f'50 ° C, 10 min f'94 ° C, 15 s f'95 ° C, u 1 min f'60 ° C għal 40 ċiklu. Il-konċentrazzjoni tal-ġene fil-mira ġiet iddeterminata bl-użu tal-metodu komparattiv Ct (numru taċ-ċiklu tal-limitu f'punt inkroċjat bejn il-plott tal-amplifikazzjoni u l-limitu), skont l-istruzzjonijiet tal-manifattur.

Prezz FOB:US $0.5 - 9,999 / Biċċa

Kwantità Min.Order:100 Biċċa/Biċċiet

Kapaċità ta' Provvista:10000 Biċċa/Biċċiet kull Xahar

Ibgħat email lilna

Dettall tal-Prodott

Tags tal-Prodott

L-osteoartrite (OA) hija l-aktar disturb muskuloskeletali frekwenti u l-aktar marda deġenerattiva komuni tal-ġogi fl-anzjani [1]. OA hija kundizzjoni kkawżata parzjalment minn korriment, telf ta 'struttura u funzjoni tal-qarquċa, u disregolazzjoni ta' mogħdijiet proinfjammatorji u anti-infjammatorji [2,3]. Taffettwa primarjament il-qarquċa artikolari u l-għadam subkondrali tal-ġogi sinovjali u tirriżulta f’falliment tal-ġogi, li jwassal għal uġigħ meta ġġorr il-piż inkluż il-mixi u l-wieqfa.4].

M'hemm l-ebda kura għall-OA, peress li huwa diffiċli ħafna li tirrestawra l-qarquċa ladarba din tinqered [5]. L-għanijiet tat-trattament huma li ttaffi l-uġigħ, iżżomm jew ittejjeb il-mobilità tal-ġogi, iżid is-saħħa tal-ġogi, u timminimizza l-effetti ta 'diżabbiltà tal-marda. It-trattamenti farmakoloġiċi tal-OA għandhom l-għan li jnaqqsu l-uġigħ sabiex iżidu l-funzjoni konġunta tal-pazjent u l-kwalità tal-ħajja. Għalkemm il-qerda tal-qarquċa hija l-avveniment ewlieni fl-OA, id-degradazzjoni tal-kollaġen hija l-inċident fundamentali li jiddetermina l-progressjoni irriversibbli tal-OA f'assoċjazzjoni mal-infjammazzjoni.6,7]. Trattamenti b'attività anti-infjammatorja u chondroprotective huma mistennija li jtaffu l-uġigħ u jżommu l-integrità tal-matriċi f'pazjenti OA.

Għalhekk, it-tnaqqis tal-infjammazzjoni x'aktarx ikun ta 'benefiċċju fil-ġestjoni tal-OA. Studji reċenti jissuġġerixxu rwoli protettivi għar-riżorsi tal-ħxejjex fuq il-progressjoni tal-OA, f'termini ta 'mitigazzjoni tal-infjammazzjoni tal-kondroċiti u aktar qerda tal-qarquċa, permezz tal-kapaċità tagħhom li jinteraġixxu ma' tessuti assoċjati mal-ġogi, li jirriżultaw fil-mitigazzjoni tal-uġigħ fil-ġogi [8].

L-għerq taSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) intuża ħafna fil-mediċina tradizzjonali għat-trattament ta 'uġigħ ta' ras, uġigħ, infjammazzjoni, u artrite fil-Korea u ċ-Ċina.9,10]. L-effetti farmakoloġiċi varji ta 'Saposhnikovia divaricata(SD) jinkludu wkoll proprjetajiet anti-infjammatorji, analġeżiċi, antipiretiċi, u antiartritiċi [9,11]. Studju reċenti wera li l-estratt tal-kromon SD jippossjedi effetti potenzjali ta’ artrite antirewmatika f’mudell tal-ġurdien ta’ artrite kkaġunata mill-kollaġen.10]; madankollu, saru ftit studji biex isostnu l-attività anti-infjammatorja u kontra l-artrite taSaposhnikovia divaricataestratt (SDE).

Għalhekk, l-istudju preżenti investiga l-attivitajiet anti-infjammatorji u antiosteoartrite ta 'estratt ta' etanol ta '70% ta' SD. L-ewwel, l-effett anti-infjammatorju ta 'SDE ġie evalwatin vitrof'ċelluli RAW 264.7 indotti minn LPS. Sussegwentement, l-effett ta 'antiosteoartrite ta' SDE tkejjel billi vvaluta d-distribuzzjoni li ġġorr il-piż, id-degradazzjoni tal-qarquċa artikolari, u r-risponsi infjammatorji f'mudell tal-firien ta 'OA indott ta' monosodium iodoacetate- (MIA-).